Práctica extracción de ADN de pulpa de plátano

 

 

 

 

 

 

 

Extracción de ADN de pulpa de plátano.

Objetivo

En esta práctica realizaremos la extracción del ADN de las células de pulpa de plátano poniendo de manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite el empaquetamiento en el núcleo celular de larguísimas cadenas de esta molécula.

Tras la extracción se realizará una tinción específica del ADN obtenido.

Materiales:

-Plátano.
-Vaso de precipitados.
-Batidora de mano
-Agua destilada
-Matraz
-Alcohol
-Filtro
-Embudo para filtrar
-Tubo de ensayo
-Sal común
-Detergente tipo lavavajillas

Procedimiento

1. Batir un plátano en 250 ml de agua destilada (o mineral en su defecto, pero no del grifo) durante 15 a 20 segundos hasta obtener una papilla homogénea.

2. Por otra parte, en un vaso de precitados pequeño se mezcla una cucharada de champú o lavavajillas líquido con dos pizcas de sal de mesa.
    
3. Añadir 20 ml de agua destilada a la mezcla de champú y sal.

4. Añadir ahora tres cucharaditas del puré de plátano a lo anterior y mezclar con la espátula durante 5 ó 10 minutos evitando formar espuma.
   Durante este tiempo se pueden preparar los tubos de ensayo como se describe en el siguiente punto y discutir la acción que desempeñan el detergente y la sal.

5. Preparar un tubo de ensayo con alcohol etílico por cada grupo y poner a enfriar lo máximo que sea posible, por ejemplo en baño de agua con hielo. Mejor aún si se ha mantenido refrigerado hasta el momento de realizar la práctica.

6. Con los pasos anteriores hemos conseguido liberar el ADN en la disolución acuosa, la cual contendrá también diversos restos tisulares y celulares. Para eliminar esos restos dejamos filtrar la solución durante varios minutos en papel de filtro, filtro de cafetera o un paño de algodón suave, hasta obtener unos 5 ml de filtrado.

7. Para precipitar el ADN separándolo de la disolución, se toma una parte del filtrado con una pipeta Pasteur y se añade suavemente al tubo de ensayo que contiene el alcohol muy frío. El filtrado, más denso que el alcohol y algo turbio, se deposita en el fondo del tubo. Dejar reposar durante 2 ó 3 minutos sin moverlo en absoluto.

8. Veremos precipitar ADN de color blanco en la interfase con el alcohol y ascender lentamente.

  

Resultado práctica: Separación de pigmentos vegetales por cromatografía en papel.

Separación de pigmentos vegetales por cromatografía en papel

 Cromatografía:

La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.

Materiales:

• Hojas de espinacas

• Zanahorias

• 10 cm3 de éter de petróleo

• 2 cm3 de alcohol etílico

• Rotuladores de color

• Papel de filtro

• Tijeras

• Medidor de cm3

- Pasos: 


PASO 1: Se machacan las hojas de espinaca/zanahoria (en este caso se utilizará carbonato cálcico para que se rompa más fácil al machacarlo)

 

PASO 2:  Se le añade el éter de petróleo y el alcohol etílico y se sigue machacando

 

PASO 3:  Se filtra la mezcla

 

PASO 4: La mezcla se vierte en una placa de petri pequeña

 

PASO 5: En otra placa de petri pequeña se vierte alcohol etílico y el éter de petróleo y se coloca igualmente papel de filtro doblado con una franja coloreada de un color secundario.

PASO 6: Se coloca papel de filtro en forma de hoja doblada.

 

 

Elaboración de jabón casero

INGREDIENTES.
Para realizar esta práctica necesitaremos los siguientes ingredientes:
-Medio litro de aceite usado.
-100 gramos de sosa cáustica.
-Medio litro de agua.
-Una cucharada de sal.

 

   

 ^Preparación 

 <sup>1-Añadir lenta y cuidadosamente la sosa caústica en el agua pues la reacción química producida es peligrosa y puede producir quemaduras. En este prodoceso podremos observar que el recipiente en el cual llevemos a cabo el proceso se calentará pues la reacción libera calor.

2-Terminado el proceso anterior procedemos a vertir el aceite lentamente en el preparado realizado en el primer paso a la vez que removemos a una velocidad prudente el preparado. Es importante que la dirección en la que se remueva sea siempre la misma puesto que de lo contrario no se conseguiría el objetivo deseado para obtener el jabón.

3- Seguir removiendo hasta obtener una mezcla algo espesa</sup>.

^{4-Dejar en reposo la mezcla y esperar a que esta se endurezca(1-2 días). Después tan solo deberás sacar el jabón del recipiente y ya tendrás tu jabón preparado y listo para usarlo.}   

Determinación de grupos sanguíneos.

Grupos sanguíneos:

Un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las características presentes o no en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero de la sangre. Las dos clasificaciones más importantes para describir grupos sanguíneos en humanos son los antígenos (el sistema ABO) y el factor Rh.
El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, convirtiéndolo en el primer grupo sanguíneo conocido; su nombre proviene de los tres tipos de grupos que se identifican: los de antígeno A, de antígeno B, y "O". Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reacción inmunológica que puede desembocar en hemólisis, anemia, fallo renal, shock y muerte.



Reacción antígeno - anticuerpo de aglutinación 


El motivo exacto por el que las personas nacen con anticuerpos contra un antígeno al que nunca han sido expuestas es desconocido. Se piensa que algunos antígenos bacterianos son lo bastante similares a estos antígenos A y B que los anticuerpos creados contra la bacteria reaccionan con los glóbulos rojos ABO-incompatibles.

Abundancia de los grupos sanguíneos en España es la 

siguiente:

Materiales

1- Solución Anti- A
2- Solución Anti- B
3- Solución Anti- D (Anti Rh)
4- Material punzante estéril
5- Algodón
6- Alcohol
7- 3 gotas de sangre

Procedimiento

PASO 1:

Pinchar la yema del dedo, previa desinfección con alcohol o agua oxigenada. Depositar tres gotitas de sangre en el portaobjetos.

 

PASO 2:

Se procede a echar una gotita de cada solucion en cada gotita de sangre y esperamos a que alguno reaccione.

 

PASO 3:

Observar los resultados. El grupo sanguineo del individuo corresponderá con el de la casilla en la que la sangre haya coagulado. Si el individuo es del grupo AB, la sangre coagulará en las tres primeras casillas. Además, si la sangre coagula en la casilla "anti-D", el individuo será Rh positivo, de lo contrario será Rh negativo.

 

 

 

Observación de mitosis en meristemos de raíz de ajo (fotos tomadas durante la práctica)

Fotos tomadas durante la prueba de observación de mitosis en meristemos de raíz de ajo

Observación de mitosis en meristemos de raíz de ajo

                                        Mitosis 

La mitosis es un proceso que ocurre en el núcleo de las células eucariotas y que precede inmediatamente a la división celular, consistente en el reparto equitativo del material hereditario (ADN) característico. Este tipo de división ocurre en las células somáticas y normalmente concluye con la formación de dos núcleos separados (cariocinesis), seguido de la separación del citoplasma (citocinesis), para formar dos células hijas.

- Fases:

1.- Profase, en esta primera etapa, el material cromosómico llamado cromatina se condensa y aparece gradualmente como barras cortas y los cromosomas pueden comenzar a observarse con el microscopio.

2.- Metafase, es la segunda etapa de la mitosis durante la cual los pares de cromátidas se mueven hacia el centro o ecuador de la célula. Las cromátidas se disponen en una fila formando ángulos rectos con las fibras del huso mitótico.

3.- Anafase, es la tercera etapa de la mitosis; al comienzo, el centrómero de cada par se divide y los cromosomas separados son jalados hacia los polos o extremos del huso mitótico por las fibras del huso que se han pegado al cinetocoro.

4.- Telofase es la última etapa de la mitosis, los cromosomas toman la forma de hilos, se alargan y quedan como estaban al comienzo de la profase.

MERISTEMO APICAL DE LA RAÍZ:  el meristemo o meristema apical de la raíz es el tejido meristemático cuyas divisiones originan las células que, tras diferenciarse, forman los tejidos adultos de la raíz. 

   

-Procedimiento:

1. Se corta con un bisturí la punta de las raíces del ajo.
2. Se le echa una gotita de Orceina A y se flama con ayuda de un mechero de alcohol.
3. Se coje la preparación en la placa de petri y el portaobjetos.
4. Se lava con un poco de agua.
5. Se le echa una gotita esta vez de Orceina B y se vuelve a flamar.
6. Se le pone el cubreobjetos.
7. Con un lápiz se expande para que no quede aire entre el cubreobjetos y la preparación.
8. Ya se mira al microscopio.

Obsevación al microscopio de agua estancada

Parte teórica:

Agua estancada

El agua puede quedar atrapada en la superficie del suelo porque está saturado o porque es impermeable y no hay suficiente desnivel para que escurra. Si existe un cantidad importante de materia orgánica y nutrientes, los microorganismos crecerán hasta que se acabe todo el oxígeno (disuelto en el agua) que necesitan para respirar. 

Cuando esto ocurre, suelen predominar en el agua los microorganismos que pueden vivir sin oxígeno y utilizan otras sustancias para respirar. El agua estancada tiene entonces ese típico olor a "podrido", debido a sustancias como sulfuros, metano e hidrógeno, que son producidas por los microorganismos al respirar. Este fenómeno es muy importante en los humedales. Si bien la cantidad de agua en estos sistemas es pequeña, se produce en ellos gases que se dispersan a través de la atmósfera, como el metano y el óxido nitroso, que tienen un papel muy importante en el aumento del efecto invernadero.

-Procedimiento

-Cogemos con el cuentagotas un poco de agua, mientras más sucia esté, mejor.

- Colocamos un poco de agua estancada en el portaobjetos

-Ponemos encima el cubreobjetos

-Observamos el agua al microscopio.

-Principales organismos que se pueden observar

                                        

                                                PARAMECIO

  

                                    

                                                   AMEBA 

                                     

                                                                 

                                                                   

                                                                      EUGLENA

                                      eUE

                                               

                                               Fotos de la práctica: 

Práctica visualización de células de la mucosa bucal y frotis de sangre

 

 

-Mucosa bucal :

 

                                                                     Frotis de sangre :

Visualización de células de la mucosa bucal y frotis de sangre

- Grupos sanguíneos. 

 Un frotis o extendido de sangre es un mecanismo científico que consiste en el extendido de una gota de sangre sobre la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos con el fin de analizarla  al microscopio

-Materiales: 

1- Material punzante estéril
2- Algodón
3- Alcohol
4- Gota de sangre

-Procedimiento:

1. Pinchar la yema del dedo, previa desinfección con alcohol o agua oxigenada.


2. Depositar una gota de sangre en el portaobjetos

3. Observar al microscopio

-Mucosa bucal

Una mucosa es una capa formada por epitelio que reviste las paredes internas de los órganos que están en contacto con el exterior del cuerpo. Suele estar asociada a numerosas glándulas secretoras de moco. En general, presentan funciones de protección, secreción y absorción, y albergan subsistemas inmunológicos muy desarrollados y especializados.

-Objetivos

Los objetivos serán:
- Reconocer células animales, distinguiendo su morfología típica.
- Observación del epitelio plano estratificado de la mucosa bucal.

-Materiales

-Microscopio óptico.
-Portaobjetos y cubreobjetos.
-Mucosa bucal.
-Aguja.
-Azul de metileno.
-Bandeja..
-Mechero de gas.
-Pinzas de madera.
-Frotis.

-Procedimiento: 

1. Raspar suavemente con el extremo romo de un mondadientes partido (o equivalente) en la parte interior de la mejilla. Depositar el material blanquecino extraído en el porta en el que previamente hemos depositado una gota de agua. Hacer suavemente un frotis con una aguja enmangada.

2. Realizada la extensión, calentar el porta a la llama del mechero

3. Evaporada el agua, se cubre toda la muestra con azul de metileno durante 2-3 minutos

4. Observar y reconocer las partes visibles de las células.

Práctica observación de células vegetales

 

 

 

 

Observación de células vegetales al microscopio, epidermis de cebolla y corte de hojas

                                   CÉLULA VEGETAL
 

Una célula es la unidad fundamental de un organismo vivo que cuenta con capacidad de reproducción independiente. Existen dos grandes tipos de células: las eucariotas (que albergan la información genética en un núcleo celular) y las procariotas (cuyo ADN está disperso en el citoplasma ya que no cuentan con un núcleo celular diferenciado).

 

Un vegetal, por otra parte, es un ser orgánico que crece y vive sin mudar de lugar por impulso voluntario. Los vegetales tienen la capacidad de sintetizar su propio alimento mediante el proceso de fotosíntesis.

La célula vegetal, por lo tanto, es aquella que forma este tipo de organismos. Se trata de células eucariotas, cuyo núcleo está delimitado por una membrana. La pared celular es celulósica y tiene la rigidez necesaria para evitar los cambios de posición y forma.

 

 

 

 

                                 

 

 



 

- Objetivo:

El objetivo de esta práctica es observar una célula vegetal al microscopio óptico
 

 

- Procedimiento:

1- Cogemos un trozo de cenolla y se le quita la epidermis
2- Se extiende en el portaobjetos y se tinta con azul de metileno
3- Se seca el azul de metileno con un mechero durante unos dos minutos
4- Se aclara y ya esta listo para verse a través del microscopi

- Hoja vegetal:

-Procedimiento:
 Realizaremos un corte sobre la hoja con un micrótomo. Un micrótomo es un instrumento de corte que nos permite cortar un material en muy finas "rebanadas" para que sea posible su observación, ya que si esta se realizara con otra herramienta, no podríamos observar la hoja.Después de esto, dispondremos la hoja en el microscopio óptico y la observaremos y analizaremos sus células con distintos aumentos.

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