Extracción de ADN de pulpa de plátano.

Objetivo

En esta práctica realizaremos la extracción del ADN de las células de pulpa de plátano poniendo de manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite el empaquetamiento en el núcleo celular de larguísimas cadenas de esta molécula.

Tras la extracción se realizará una tinción específica del ADN obtenido.

Materiales:

-Plátano.
-Vaso de precipitados.
-Batidora de mano
-Agua destilada
-Matraz
-Alcohol
-Filtro
-Embudo para filtrar
-Tubo de ensayo
-Sal común
-Detergente tipo lavavajillas

Procedimiento

1. Batir un plátano en 250 ml de agua destilada (o mineral en su defecto, pero no del grifo) durante 15 a 20 segundos hasta obtener una papilla homogénea.

2. Por otra parte, en un vaso de precitados pequeño se mezcla una cucharada de champú o lavavajillas líquido con dos pizcas de sal de mesa.
    
3. Añadir 20 ml de agua destilada a la mezcla de champú y sal.

4. Añadir ahora tres cucharaditas del puré de plátano a lo anterior y mezclar con la espátula durante 5 ó 10 minutos evitando formar espuma.
   Durante este tiempo se pueden preparar los tubos de ensayo como se describe en el siguiente punto y discutir la acción que desempeñan el detergente y la sal.

5. Preparar un tubo de ensayo con alcohol etílico por cada grupo y poner a enfriar lo máximo que sea posible, por ejemplo en baño de agua con hielo. Mejor aún si se ha mantenido refrigerado hasta el momento de realizar la práctica.

6. Con los pasos anteriores hemos conseguido liberar el ADN en la disolución acuosa, la cual contendrá también diversos restos tisulares y celulares. Para eliminar esos restos dejamos filtrar la solución durante varios minutos en papel de filtro, filtro de cafetera o un paño de algodón suave, hasta obtener unos 5 ml de filtrado.

7. Para precipitar el ADN separándolo de la disolución, se toma una parte del filtrado con una pipeta Pasteur y se añade suavemente al tubo de ensayo que contiene el alcohol muy frío. El filtrado, más denso que el alcohol y algo turbio, se deposita en el fondo del tubo. Dejar reposar durante 2 ó 3 minutos sin moverlo en absoluto.

8. Veremos precipitar ADN de color blanco en la interfase con el alcohol y ascender lentamente.